基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵支撐是科研細(xì)胞庫，其規(guī)范狀況直接判定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和可靠性，細(xì)胞庫管理若混亂，后續(xù)所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果都會(huì)喪失意義，所以從源頭把控細(xì)胞質(zhì)量極為關(guān)鍵。
細(xì)胞庫如何分級(jí)管理
細(xì)胞庫一般有三級(jí)劃分，分別是原始庫、主庫以及工作庫。原始庫作為細(xì)胞的起始源頭，其身份與純度要經(jīng)過嚴(yán)格驗(yàn)證。主庫是從原始庫擴(kuò)展而來的，需要進(jìn)行分裝凍存以及全面檢測(cè)鑒定。工作庫可直接應(yīng)用于平常的實(shí)驗(yàn)。每一級(jí)別之間都得構(gòu)建清晰的追溯記錄，以此保證任何異常情況能夠迅速定位其源頭。
凍存細(xì)胞時(shí)要注意什么
凍存液配方是關(guān)鍵點(diǎn)之一，降溫速率是關(guān)鍵點(diǎn)之一，存儲(chǔ)溫度是關(guān)鍵點(diǎn)之一。建議使用無血清凍存液，建議使用含10%二甲基亞砜的完全培養(yǎng)基，采用程序降溫盒實(shí)現(xiàn)勻速度降溫，每分鐘降-1℃。液氮?dú)庀啻鎯?chǔ)此液相比液相更具安全性，能避免交叉污染情況發(fā)生。每個(gè)凍存管都應(yīng)當(dāng)標(biāo)注細(xì)胞名稱，每個(gè)凍存管都應(yīng)當(dāng)標(biāo)注代次，每個(gè)凍存管都應(yīng)當(dāng)標(biāo)注日期，每個(gè)凍存管都應(yīng)當(dāng)標(biāo)注操作人，杜絕信息缺失現(xiàn)象出現(xiàn)。
如何防止細(xì)胞交叉污染
細(xì)胞庫最常見的問題屬交叉污染，操作時(shí)需嚴(yán)格依照“一管一吸”原則，不同的細(xì)胞系要有獨(dú)立培養(yǎng)基以及移液管，要定期針對(duì)培養(yǎng)箱還有生物安全柜展開清潔消毒，且運(yùn)用短串聯(lián)重復(fù)序列技術(shù)來鑒定細(xì)胞身份，建議每半年對(duì)庫內(nèi)存貨抽檢一回，及時(shí)把疑似污染的凍存管全部剔除。
細(xì)胞復(fù)蘇后多久能用于實(shí)驗(yàn)
經(jīng)過復(fù)蘇的細(xì)胞，其恢復(fù)活力所需時(shí)間為1至3天。在最初前的24小時(shí)之內(nèi)，應(yīng)當(dāng)運(yùn)用含有雙抗的培養(yǎng)基，以此抑制潛在的污染情況。一直要待到細(xì)胞貼壁并且伸展之后，才可以去更換新鮮的培養(yǎng)基。傳代達(dá)到或者超過2至3次以后，要對(duì)細(xì)胞的形態(tài)、增殖的速度以及特異的標(biāo)志物進(jìn)行觀察，只有確認(rèn)穩(wěn)定之后，才能夠正式將其用于實(shí)驗(yàn)當(dāng)中。切不可使用剛剛經(jīng)過復(fù)蘇的細(xì)胞，直接去進(jìn)行藥敏或者轉(zhuǎn)染的測(cè)試。
在最終之際想問你，于實(shí)際的操作過程當(dāng)中，你遭遇過細(xì)胞庫管理最為棘手的難題是啥，歡迎于評(píng)論區(qū)域分享你的經(jīng)驗(yàn)。
